Highspeed TEER-Messung von MDCK-I-Zellen
während der Lyse durch Beigabe von Saponin

Zellbiologische Effekte können mitunter sehr schnell ablaufen. Bei unzureichender Zeitauflösung kann dies dazu führen, dass Effekte oder temporäre Änderungen messtechnisch nicht abgebildet und beobachtet werden können. Das cellZscope 3 ist mit einer Zeitauflösung von einem Datenpunkt pro 30 s in bis zu 96 parallelen Wells in der Lage diese schnellen Prozesse zu erfassen.

In dem hier gezeigten Experiment wurden MDCK-I-Zellen im cellZscope auf Inserts kultiviert. Es wurde gewartet, bis diese einen konfluenten Monolayer ausgebildet hatten und der TEER einen konstanten Wert erreichte. Im Anschluss wurden die Zellen unterschiedlichen Konzentrationen von Saponin ausgesetzt.
Saponin wird oft als Modellsubstanz / Positivkontrolle verwendet, wenn z.B. Substanzen untersucht werden, die zu einer Lyse der Zellmembran führen kann. Wird die Zellmembran durch eine Substanz lysiert, ist mitunter eine ausreichend gute Zeitauflösung notwendig, um dosisabhängige Unterschiede der Barriere-Dynamik verfolgen zu können.

TEER/TEER_0h vs. Zeit von MDCK-I Zellen ausgesät mit einer Zelldichten von 495000 Zellen/cm². Zum Zeitpunkt t = 0 min wurde Saponin in verschiedenen Konzentrationen zugegeben; Orange: Kontrolle (L15-Medium), Hellblau: 20 µg/ml Saponin, Blau: 50 µg/ml Saponin, Dunkelblau: 100 µg/ml Saponin.

Mit dem cellZscope3 lassen sich diese schnellen Prozesse beobachten, ohne dass auf eine umfassende Impedanzanalyse verzichtet werden muss. Durch das Messen eines breiten Frequenzspektrums ist sichergestellt, dass die Zellschichteigenschaften (TEER und Kapazität) eindeutig und akkurat bestimmt werden.

_{nanoAnalytics dankt Tobias Naber und J. Wegener (Universität Regensburg) für ihre umfassende Unterstützung.}